北京百奧萊博供應(yīng)的支原體檢測試劑盒(PCR法)用于科研試驗(yàn)，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多支原體檢測試劑盒(PCR法)等物種PCR檢測試劑盒產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括支原體檢測試劑盒(PCR法)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：支原體檢測試劑盒(PCR法)
英文名稱：EZ-PCR Mycoplasma Detection Kit
產(chǎn)品貨號：BD1004
產(chǎn)品規(guī)格：20次

本試劑盒是高靈敏度的支原體檢測試劑盒，采用特異性PCR方法，用于細(xì)胞培養(yǎng)或其他生物樣本中支原體的廣譜檢測。試劑盒帶有優(yōu)化的PCR Mix，包含多種支原體特異性引物、dNTPs、Taq酶。在細(xì)胞培養(yǎng)中，每3～6個月須進(jìn)行支原體污染的常規(guī)檢測。本試劑盒可以高靈敏、高特異性檢測多種支原體，且不受培養(yǎng)基成分的干擾，包括：M.fermentans, M.hyorhinis, M.arginini, M.orale, M.salivarium, M.hominis, M.pulmonis, M.arthritidis, M.bovis, M.pneumoniae, M.pirum and M.capricolum, and Acholeplasma and Spiroplasma species。

試劑盒組成：

組分	規(guī)格
Reaction Mix	200μl
Buffer Solution	1ml
Positive Template Control	20μl
Internal control DNA template	20μl
Internal control primers mix	100μl

保存條件：-20℃，避免反復(fù)改變試劑盒保存溫度，使用時請將試劑管始終置于冰上。

自備試劑：礦物油、瓊脂糖、無菌蒸餾水

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名稱：牛源性成分單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒
貨號：SYA290
規(guī)格：48次/盒
一、簡介
本試劑盒用一對牛源性成分特異性引物，結(jié)合一條特異性熒光探針，用熒光PCR技術(shù)對牛源性成分DNA進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測。本試劑盒中牛源性成分的探針報(bào)告基團(tuán)為FAM。

二、用途
該試劑盒適合于各種飼料及其它樣品中牛源性成分的檢測。

三、試劑盒組成(48T)
組成成分 數(shù)量 規(guī)格
牛物種熒光qPCR反應(yīng)液(Bos-qPCR MIX) 1管 600μL/管
陰性對照(NTC) 1管 50μL/管
陽性對照(Bos-PTC) 1管 50μL/管

四、儲存條件及有效期
本試劑盒于-20℃以下保存，有效期為6個月。

五、熒光PCR儀器適用范圍
ABI系列，Bio-Rad系列，Roche系列等熒光定量PCR檢測儀等。

六、樣品采集與DNA提取
6.1 樣品采集
樣品的采集按照標(biāo)準(zhǔn)《飼料中牛羊源性成分的定性檢測定性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求進(jìn)行。
6.2 DNA提取
可采購北京百奧萊博科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品，并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
 注：陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取)，直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高，建議zuì后在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。

七、檢測步驟：
7.1 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(Bos-qPCR MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 15μL N×15μL
向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品/陰性對照(NTC)/陽性對照(Bos-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入實(shí)時熒光PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸時收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM，淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX 參比熒光。

八、結(jié)果分析
8.1 結(jié)果分析條件設(shè)定
直接讀取檢測結(jié)果。基線和閾值設(shè)定原則根據(jù)儀器噪聲情況進(jìn)行調(diào)整，以閾值線剛好超過正常陰性樣品擴(kuò)增曲線的zuì高點(diǎn)為準(zhǔn)。
8.2 試驗(yàn)成立判定
（1） 陰性對照(NTC)：不應(yīng)產(chǎn)生任何的擴(kuò)增曲線。
（2） 陽性對照(Bos-PTC)：均產(chǎn)生擴(kuò)增曲線。
（3） 以上條件應(yīng)同時滿足，否則，此次試驗(yàn)視為無效。
8.3 結(jié)果判定
（1） 在試驗(yàn)成立的條件下，Ct值≤35的樣本為陽性，表明牛源性成分核酸陽性。
（2） Ct值顯示為無的樣本為陰性樣本，表明牛源性成分核酸陰性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判為可疑樣品。對于可疑樣品，先看擴(kuò)增曲線。如果擴(kuò)增曲線為對數(shù)擴(kuò)增曲線，則為可疑陽性，否則判為陰性。
（4） 對于可疑陽性樣品，重新抽提核酸，再次進(jìn)行牛源性成分qPCR檢測。如果重復(fù)擴(kuò)增曲線為對數(shù)擴(kuò)增曲線，判為樣本陽性，表明牛源性成分核酸陽性；否則判為樣本陰性。

九、注意事項(xiàng)：
（1） 初次使用前請仔細(xì)閱讀說明書。并嚴(yán)格按照說明書步驟操作。
（2） 所有使用的離心管應(yīng)高壓滅菌，而且必須不含DNA酶。
（3） PCR操作應(yīng)嚴(yán)格按照要求分區(qū)(試劑配制區(qū)、標(biāo)本處理區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)等)，防止實(shí)驗(yàn)室污染。
（4） 樣本提取、試劑配置、加樣需在不同區(qū)的超凈工作臺進(jìn)行，以免污染。
（5） 試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待，并按照衛(wèi)生部《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。



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