SY0475 TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

產(chǎn)品簡介
北京百奧萊博供應(yīng)的TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒用于科研試驗,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒等細(xì)胞凋亡與增殖產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示:包括TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(FITC)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(FITC)
英文名稱:TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC)
產(chǎn)品貨號:SY0475
產(chǎn)品規(guī)格:20T|100T
本試劑盒應(yīng)用范圍廣,可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況,也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。
細(xì)胞在發(fā)生凋亡時,會激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時抽提DNA進(jìn)行電泳檢測,可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(FITC)可以用來檢測組織細(xì)胞在凋亡晚期過程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況。其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的作用下,在基因組DNA斷裂時暴露出的3′-羥基(3′-OH)末端摻入FITC-12-dUTP,從而可以用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測。
本試劑盒對標(biāo)記反應(yīng)進(jìn)行了優(yōu)化,采用zuì佳比例的FITC-12-dUTP和未標(biāo)記dNTP進(jìn)行3’-OH末端的核苷酸摻入,使得同一個斷裂的DNA片段末端可以形成更長的“標(biāo)記尾巴”。該“標(biāo)記尾巴”減少了相鄰摻入dNTP上標(biāo)記基團(tuán)的空間位阻,增加每個斷裂片段上的熒光基團(tuán)數(shù)目,降低熒光基團(tuán)相鄰后可能造成的聚集和淬滅,從而提高檢測靈敏度,減少非特異性反應(yīng)。
試劑盒組份:
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
注意事項
1)需自備用于洗滌細(xì)胞的PBS,用于封片的抗熒光淬滅封片液,用于固定的4%多聚甲醛。
2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
儲存條件:-20℃,有效期一年。
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名稱:CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒
貨號:YT157
規(guī)格:2000次
本試劑盒是基于一種熒光探針CFDA SE的用于細(xì)胞增殖檢測和細(xì)胞熒光示蹤的檢測試劑盒。CFDA SE目前被廣泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine摻入等其它細(xì)胞增殖檢測方法。基于CFDA SE熒光標(biāo)記的細(xì)胞增殖檢測和[3H]-thymidine摻入、BrdU標(biāo)記獲得的檢測結(jié)果完全一致,但同時可以提供更多的細(xì)胞增殖信息。使用CFDA SE檢測可以提供整個細(xì)胞群中有多少比例的細(xì)胞分裂了1次、2次或更多次數(shù),同時如果和其它熒光探針聯(lián)用,可以獲取不同分裂次數(shù)細(xì)胞的其它相關(guān)信息。
CFDA-SE的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式為C29H19NO11,分子量為557.47,CAS number為150347-59-4。CFDA SE可以通透細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng),并標(biāo)記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時,即可充分標(biāo)記細(xì)胞。被CFDA SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標(biāo)記的時間可達(dá)數(shù)個月。CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,比以前使用的其它細(xì)胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均勻。
由于CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定,每分裂一次子代細(xì)胞的熒光會減弱一半,這樣通過流式細(xì)胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細(xì)胞,分裂一次的細(xì)胞(1/2的熒光強(qiáng)度),分離兩次的細(xì)胞(1/4的熒光強(qiáng)度),分裂三次的細(xì)胞(1/8的熒光強(qiáng)度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細(xì)胞。采用CFDA SE通過流式細(xì)胞儀檢測獲得的檢測結(jié)果參考右圖。每一個峰代表一種分裂次數(shù)的細(xì)胞,從右至左的峰通常依次為分裂0次、1次、2次、3次等次數(shù)的細(xì)胞。分裂次數(shù)較多后,分裂0次或1次等沒有分裂或分裂次數(shù)較少的細(xì)胞會逐漸減少直至檢測不到。
使用CFDA SE可以檢測分裂多達(dá)8次或更多次數(shù)的細(xì)胞增殖。目前CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。zuì常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測,也可以用于成纖維細(xì)胞、NK細(xì)胞等其它細(xì)胞的增殖檢測,甚至還可以用于細(xì)菌增殖的檢測。
CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm,此時的發(fā)射波長為518nm,使用流式細(xì)胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞也可以用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞無論在體外還是體內(nèi)都不會使鄰近細(xì)胞染色。即CFDA SE熒光探針完成標(biāo)記后不會從一個細(xì)胞轉(zhuǎn)移到鄰近細(xì)胞。CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞僅需5-15分鐘即可完成。對于不同細(xì)胞,zuì佳標(biāo)記時間需自行摸索。
本試劑盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記時所需的配套試劑。如果每個檢測樣品的熒光探針標(biāo)記體積為1ml,本試劑盒共可以檢測2000個樣品。

試劑盒組份:
CFDA SE——————————————1管
CFDA SE溶劑————————————1ml/管,共兩管
CFDA SE細(xì)胞標(biāo)記液(10X) ——————100ml/瓶,共兩瓶
注意事項:
1. CFDA SE配制成儲存液后宜在一個月內(nèi)使用完畢,zuì長不宜超過2個月。CFDA SE易被水解,在水溶液中會很快變質(zhì)。請在使用過程中避免接觸水。在標(biāo)記細(xì)胞的過程中和水接觸是在許可的范圍內(nèi)的。
2. CFDA SE溶劑在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
儲存條件:-20℃,有效期6個月。

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