KFS212 細(xì)胞凋亡線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞凋亡線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒是高品質(zhì)的細(xì)胞凋亡與增殖產(chǎn)品,由北京百奧萊博供應(yīng),本產(chǎn)品僅用于生物化學(xué)研究方面,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價(jià)格,深為用戶稱道,了解更多細(xì)胞凋亡線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒等細(xì)胞凋亡與增殖產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢訂購(gòu)。...
特別提示:包括細(xì)胞凋亡線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:細(xì)胞凋亡線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1)
英文名稱:JC-1 Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品貨號(hào):KFS212
產(chǎn)品規(guī)格:10T|20T|50T|100T
本試劑盒可應(yīng)用于細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位檢測(cè)。大量的研究表明線粒體與細(xì)胞凋亡密切相關(guān),其中線粒體跨膜電位(△?)的破壞,被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)過程中zuì早發(fā)生的事件之一,它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征(染色質(zhì)濃縮、DNA斷裂)出現(xiàn)之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰,則細(xì)胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。
本試劑盒采用JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)一種陽(yáng)離子脂質(zhì)熒光染料作為檢測(cè)線粒體跨膜電位指示劑。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài),在低濃度時(shí)以單體的形式存在,高濃度時(shí)以多聚體形式存在,兩者的發(fā)射光譜不同,但均可在流式細(xì)胞儀綠色(FL-1)通道檢測(cè)出綠色熒光,JC-1可透過正常細(xì)胞膜以單體狀態(tài)聚集胞內(nèi),正常健康線粒體的膜電位(△?)具有性,JC-1依賴于△?的性被迅速攝入線粒體內(nèi),并因濃度增高而在線粒體內(nèi)形成多聚體,多聚體發(fā)射光為紅色熒光;可被流式細(xì)胞儀的紅色(FL-2)通道檢測(cè)到,而細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),線粒體跨膜電位被去化,JC-1從線粒體內(nèi)釋放,紅光強(qiáng)度減弱,以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光。根椐這一特征檢測(cè)線粒體膜電位的變化。
注意事項(xiàng)
1. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2. JC-1 避光保存及使用。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)至匯合度80-90%,收集細(xì)胞量在1×106/Test。
4. 對(duì)PH 變化過于敏感的細(xì)胞建議用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗滌,或延長(zhǎng)觀測(cè)時(shí)間。
5. 流式細(xì)胞儀檢測(cè)線粒體膜電位變化受到多種因素的影響,因誘導(dǎo)劑、細(xì)胞株類型,作用時(shí)間的不同而熒光強(qiáng)度比例都有不同,因此沒有通用標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)償設(shè)門指南,因此每個(gè)試驗(yàn)需設(shè)陰性及陽(yáng)性對(duì)照組進(jìn)行熒光補(bǔ)償及設(shè)門。
6. 組織需先制備單細(xì)胞懸液或提取純化線粒體后方可進(jìn)行檢測(cè),可選用我司細(xì)胞懸液制備試劑盒或線粒體提取試劑盒。
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名稱:CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒
貨號(hào):YT157
規(guī)格:2000次
本試劑盒是基于一種熒光探針CFDA SE的用于細(xì)胞增殖檢測(cè)和細(xì)胞熒光示蹤的檢測(cè)試劑盒。CFDA SE目前被廣泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine摻入等其它細(xì)胞增殖檢測(cè)方法?;贑FDA SE熒光標(biāo)記的細(xì)胞增殖檢測(cè)和[3H]-thymidine摻入、BrdU標(biāo)記獲得的檢測(cè)結(jié)果完全一致,但同時(shí)可以提供更多的細(xì)胞增殖信息。使用CFDA SE檢測(cè)可以提供整個(gè)細(xì)胞群中有多少比例的細(xì)胞分裂了1次、2次或更多次數(shù),同時(shí)如果和其它熒光探針聯(lián)用,可以獲取不同分裂次數(shù)細(xì)胞的其它相關(guān)信息。
CFDA-SE的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式為C29H19NO11,分子量為557.47,CAS number為150347-59-4。CFDA SE可以通透細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng),并標(biāo)記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時(shí),即可充分標(biāo)記細(xì)胞。被CFDA SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)個(gè)月。CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,比以前使用的其它細(xì)胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均勻。
由于CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定,每分裂一次子代細(xì)胞的熒光會(huì)減弱一半,這樣通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)就可以檢測(cè)出沒有分裂的細(xì)胞,分裂一次的細(xì)胞(1/2的熒光強(qiáng)度),分離兩次的細(xì)胞(1/4的熒光強(qiáng)度),分裂三次的細(xì)胞(1/8的熒光強(qiáng)度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細(xì)胞。采用CFDA SE通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)獲得的檢測(cè)結(jié)果參考右圖。每一個(gè)峰代表一種分裂次數(shù)的細(xì)胞,從右至左的峰通常依次為分裂0次、1次、2次、3次等次數(shù)的細(xì)胞。分裂次數(shù)較多后,分裂0次或1次等沒有分裂或分裂次數(shù)較少的細(xì)胞會(huì)逐漸減少直至檢測(cè)不到。
使用CFDA SE可以檢測(cè)分裂多達(dá)8次或更多次數(shù)的細(xì)胞增殖。目前CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)。zuì常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè),也可以用于成纖維細(xì)胞、NK細(xì)胞等其它細(xì)胞的增殖檢測(cè),甚至還可以用于細(xì)菌增殖的檢測(cè)。
CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,檢測(cè)時(shí)的激發(fā)波長(zhǎng)可以選擇488nm,此時(shí)的發(fā)射波長(zhǎng)為518nm,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)可以采用FL1 detection channel。CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞也可以用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞無論在體外還是體內(nèi)都不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色。即CFDA SE熒光探針完成標(biāo)記后不會(huì)從一個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到鄰近細(xì)胞。CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞僅需5-15分鐘即可完成。對(duì)于不同細(xì)胞,zuì佳標(biāo)記時(shí)間需自行摸索。
本試劑盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記時(shí)所需的配套試劑。如果每個(gè)檢測(cè)樣品的熒光探針標(biāo)記體積為1ml,本試劑盒共可以檢測(cè)2000個(gè)樣品。

試劑盒組份:
CFDA SE——————————————1管
CFDA SE溶劑————————————1ml/管,共兩管
CFDA SE細(xì)胞標(biāo)記液(10X) ——————100ml/瓶,共兩瓶
注意事項(xiàng):
1. CFDA SE配制成儲(chǔ)存液后宜在一個(gè)月內(nèi)使用完畢,zuì長(zhǎng)不宜超過2個(gè)月。CFDA SE易被水解,在水溶液中會(huì)很快變質(zhì)。請(qǐng)?jiān)谑褂眠^程中避免接觸水。在標(biāo)記細(xì)胞的過程中和水接觸是在許可的范圍內(nèi)的。
2. CFDA SE溶劑在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. 熒光染料均存在淬滅問題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期6個(gè)月。

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