羧芐青霉素鈉試劑是高品質(zhì)的抗生素類產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于科研試驗(yàn)，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價(jià)格，深為用戶稱道，了解更多羧芐青霉素鈉試劑等抗生素類產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括羧芐青霉素鈉在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：羧芐青霉素鈉
英文名稱：Carbenicillin disodium salt
產(chǎn)品貨號：Y13505
產(chǎn)品規(guī)格：1g|10g|100g

CAS：4800-94-6
分子式：C₁₇H₁₆N₂O₆SNa₂
分子量：422.36
介紹：37℃只能保證3天穩(wěn)定
熔點(diǎn)：>200℃
沸點(diǎn)：738℃
儲存條件：2～8℃
來源：合成
外觀：白色固體
溶解性：溶于水。
用途：依靠在細(xì)菌細(xì)胞膜的內(nèi)層面使轉(zhuǎn)肽酶（transpeptidases）失活抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成。類似于青霉素。抗菌譜:革蘭氏陰性和

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名稱：葛根素
貨號：QN0026
規(guī)格：1g
CAS：3681-99-0
分子式：C21H20O9
分子量：416.37
純度：98%
儲存條件：密封保存

名稱：嘌呤霉素
貨號：QN0078
規(guī)格：25mg|100mg
本品是蛋白質(zhì)合成抑制劑。抑制細(xì)菌、藻類原生物和哺乳動物細(xì)胞生長。

CAS：58-58-2
分子式：C22H29N7O5·2HCl
分子量：544.43
儲存條件：-20℃
純度：≥98%(TLC)
性狀：白色或白中帶有黃色的粉末
別名：二鹽酸嘌呤霉素;嘌呤霉素鹽酸鹽
溶解性：溶于水，參考濃度50mg/ml。

嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑鏈霉菌(Streptomyces alboniger)發(fā)酵代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素，通過抑制蛋白質(zhì)合成而殺死革蘭氏陽性菌，各種動物和昆蟲細(xì)胞。某種特殊情況下有效作用大腸桿菌。作用機(jī)制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的類似物，能夠與核糖體的A位點(diǎn)結(jié)合并摻入到延伸的肽鏈中。嘌呤霉素同A位點(diǎn)結(jié)合后，不會參與隨后的任何反應(yīng)，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成的提前終止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

嘌呤霉素產(chǎn)生菌Streptomyces alboniger內(nèi)發(fā)現(xiàn)的pac基因編碼嘌呤霉素N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAC)，賦予機(jī)體對嘌呤霉素產(chǎn)生抗性。這一特性如今普遍應(yīng)用于篩選特定攜帶pac基因質(zhì)粒的哺乳動物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。

嘌呤霉素在細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選中的普遍應(yīng)用與慢病毒載體的特性有關(guān)，現(xiàn)在商業(yè)化的慢病毒載體多數(shù)都攜帶pac基因。在某些特定情況下，嘌呤霉素亦可以用來篩選轉(zhuǎn)化攜帶pac基因質(zhì)粒的大腸桿菌菌株。

使用方法：

1.建議使用濃度
哺乳動物細(xì)胞：1-10 μg/mL，zuì佳濃度需要?dú)缜€來確定;
大腸桿菌：LB瓊脂培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)化pac基因的大腸桿菌，使用濃度為125μg/mL。注：使用嘌呤霉素篩選大腸桿菌穩(wěn)轉(zhuǎn)株需要的pH值調(diào)節(jié)，而且受宿主細(xì)胞本身的影響。

2.溶解方法
用蒸餾水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，經(jīng)0.22 μm濾膜過濾除菌后分裝于-20℃凍存;也可溶于甲醇，配制成10 mg/ml的儲存液。

3. 嘌呤霉素殺滅曲線的確定(以shRNA轉(zhuǎn)染或者慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)為例)
嘌呤霉素有效篩選濃度跟細(xì)胞類型、生長狀態(tài)、細(xì)胞密度、細(xì)胞代謝情況及細(xì)胞所處細(xì)胞周期位置等有關(guān)。為了篩選到穩(wěn)定表達(dá)的shRNA細(xì)胞株，確定殺死未轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的zuì低濃度嘌呤霉素至關(guān)重要。建議初次做實(shí)驗(yàn)的客戶一定要建立適合自身實(shí)驗(yàn)體系的殺死曲線(kill curve)。
1)Day 1：24孔板內(nèi)以5~8 x 104 cells/孔的密度鋪板，鋪?zhàn)銐蛄康目滓赃M(jìn)行后續(xù)的梯度實(shí)驗(yàn)。37℃細(xì)胞孵育過夜;
2)Day 2：
a)準(zhǔn)備篩選培養(yǎng)基：含不同濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基(如0-15μg/mL，至少5個(gè)梯度);
b)往孵育過夜后的細(xì)胞內(nèi)更換新鮮配制的篩選培養(yǎng)基;之后37℃孵育細(xì)胞;
3)Day 4：更換新鮮的篩選培養(yǎng)基，并觀察細(xì)胞存活率。
4)根據(jù)細(xì)胞的生長狀態(tài)，約2-3天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基;
5)每日監(jiān)測細(xì)胞，觀察存活細(xì)胞率，從而確定抗生素篩選開始4-6天內(nèi)有效殺死非轉(zhuǎn)染或者所有非轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的藥物zuì低濃度。

4. 哺乳動物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的篩選
等轉(zhuǎn)染含有pac基因的質(zhì)粒后，細(xì)胞在含有嘌呤霉素的培養(yǎng)基中增殖，以篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染子。
1)細(xì)胞轉(zhuǎn)染48h后，將細(xì)胞(原樣或稀釋)置于含有適當(dāng)濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
注意：當(dāng)細(xì)胞處于分裂活躍期時(shí)，抗生素作用zuì明顯。細(xì)胞過于密集，抗生素產(chǎn)生的效力會明顯下降。zuì好進(jìn)行細(xì)胞分盤使其密度不超過25%。
2)每隔2-3天，移除和更換含有嘌呤霉素的培養(yǎng)基。
3)篩選7天后評估細(xì)胞形成的病灶。病灶可能需要額外的一周或者更多時(shí)間，這依賴于宿主細(xì)胞系和轉(zhuǎn)染篩選效率。注意：每日進(jìn)行細(xì)胞生長狀態(tài)的觀察。嘌呤霉素的篩選至少需要48h，有效濃度嘌呤霉素的篩選周期一般在3-10天。
4)轉(zhuǎn)移和放置5-10個(gè)抗性克隆到一個(gè)35mm的培養(yǎng)皿中，用選擇培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)7天。此次富集培養(yǎng)是為日后的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)做準(zhǔn)備。

注意事項(xiàng)：
1. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2. 嘌呤霉素為有毒化合物，操作時(shí)請小心拿放。

關(guān)注羧芐青霉素鈉試劑(4800-94-6)(USP級，750mcg/g)，羧芐西林鈉，[6S-(2a,5a,6b)]-6-(羧基苯基-乙酰氨基)-3,3-二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[3·2·0]庚烷-2-甲酸二鈉鹽的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：

貨號	名稱	規(guī)格
RFT182	利福平溶液(50mg/ml)	5×1ml
RFT185	四環(huán)素鹽酸鹽溶液(50mg/ml)	5×1ml
QN0021	依克立達(dá)	10mg
QN0046	頭孢氨芐	5g
QN0065	博萊霉素	1.25ml|8×1.25ml
QN0090	硫酸慶大霉素溶液	10mL
Y13546	萘啶酮酸	1g|5g|25g|100g

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