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公司名稱:上海古朵生物科技有限公司

聯(lián)系人:洛辰

電話:18321664727

手機:13621980056

郵件:2712232205@qq.com

地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號

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人活化素A(Activin-A)ELISA定量檢測試劑盒操作流程

發(fā)布時間:2018-01-24瀏覽次數(shù):2436返回列表


    中文名:人活化素A(Activin-A)elisa試劑盒

    別名:人活化素A(Activin-A)ELISA Kit

    供貨商:上海樊克

    產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T

    保存:2-8℃

    試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

    樣本:血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

    預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

    elisa試劑盒特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好。

    Elisa試劑盒產(chǎn)地:加拿大、德國、意大利等進口知名品牌現(xiàn)貨供應(yīng)以及國產(chǎn)各類Elisa試劑盒。

    Elisa試劑盒供應(yīng)種類:1.人Elisa試劑盒、2.動物Elisa試劑盒、3.食品Elisa試劑盒、4.植物Elisa試劑盒、5.農(nóng)產(chǎn)Elisa試劑盒、6.微生物細(xì)胞Elisa試劑盒、7.其他各類Elisa試劑盒。

    產(chǎn)品用途:僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷,使用前仔細(xì)閱讀本說明書。





    人活化素A(Activin-A)ELISA定量檢測試劑盒試劑準(zhǔn)備:

    試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

    1. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶:試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品,每管已標(biāo)定濃度,并且凍干。實驗前在每個標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL樣本稀釋液,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動助其溶解,使其恢復(fù)為每個標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。

    2. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

    人活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒實驗原理

    本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人活化素A(Activin-A)水平。用純化的人活化素A(Activin-A)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入活化素A(Activin-A),再與HRP標(biāo)記的活化素A(Activin-A)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的活化素A(Activin-A)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人活化素A(Activin-A)濃度。

    人活化素A(Activin-A)ELISA定量檢測試劑盒操作流程:

    1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

    2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。

    3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

    4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

    5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

    6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘。

    7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

    8、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

    人活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒注意事項:

    1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性。

    2.若不同批號人ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。

    3.反應(yīng)時間的誤差,做大量標(biāo)本時,孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。

    4.臨界值附近標(biāo)本波動為正常現(xiàn)象,任何試劑均不可避免。可以考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。

    5.加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,但對閾值附近的標(biāo)本影響大,建議校對加樣器。

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