【古朵生物】ELISA方法的基本用途及操作程序

  1、直接ELISA試劑盒

  本法首要用于檢測(cè)抗體。以鴨病毒性肝炎(DVH)抗體的ELISA為例，直接ELISA的操作程序如下：

  (1) 資料

  ① 包被液、洗刷液、保溫液、底物液、停止液;

  ② DVH包被抗原、酶標(biāo)抗抗體、陰性及陽性DVH參閱血清;待檢鴨血清;

  ③ ELISA檢測(cè)儀、加樣器、聚苯乙烯微量板。

  (2) 方法過程

  ① 加抗原包被 → 4℃過夜，洗刷三次、拋干

  ② 加待檢血清 → 37℃ 2小時(shí)，洗刷三次、拋干

  ③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 2小時(shí)，洗刷三次、拋干

  ④ 加底物液 → 37℃ 30分鐘，加停止液

  ⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值，并計(jì)算出P/N比值。

  (3) 成果判定 已知陽性血清與已知陰性血清的比值(P/N)≥2.1，并且已知陽性血清的OD值≥0.4;在上述條件建立的情況下，如果待檢血清與已知陰性血清的比值(P/N)≥2.1，并且待檢血清的OD值≥0.4，則判為陽性，不然判為陰性。

  2、雙抗體夾心ELISA試劑盒

  本法首要用于檢測(cè)大分子抗原?，F(xiàn)以檢測(cè)雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV)的雙夾心抗體ELISA為例介紹本法的操作程序。

  ① 加抗體包被 → 4℃過夜，洗刷三次、拋干

  ② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘，洗刷三次、拋干

  ③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘，洗刷三次、拋干

  ④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘，加停止液

  ⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值。

  3、雙夾心ELISA試劑盒

  此法與雙抗體夾心ELISA的首要差異在于：它是采用酶標(biāo)抗抗體查看多種大分子抗原，它不只不用符號(hào)每一種抗體，還可進(jìn)步試驗(yàn)的敏感性。

  此法的根本程序?yàn)椋?

  ① 加抗體(Ab-1)包被 → 4℃過夜，洗刷三次、拋干

  ② 加待檢抗原(Ag) → 37℃ 60分鐘，洗刷三次、拋干

  ③ 加用非同種動(dòng)物出產(chǎn)的特異性抗體(Ab-2)→ 37℃ 60分鐘，洗刷三次、拋干

  ④ 加入酶標(biāo)抗Ab-2抗體(AB-3)→ 37℃ 60分鐘，洗刷三次、拋干

  ⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加停止液

  ⑥ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值。

  ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。