ELISA試劑盒 問(wèn)題大全

  問(wèn)題：如果試劑的體積很小，我該怎么辦?

  回答：如果試劑的體積很小，請(qǐng)?jiān)谑褂们皩⒃噭┢侩x心，以確保試劑集中于瓶底。

  問(wèn)題：不按的方法保存試劑可以嗎?

  回答：不推薦，否則試劑的質(zhì)量無(wú)法保證。

  問(wèn)題：可以將不同批號(hào)或試劑盒內(nèi)的同一試劑混用嗎?

  回答：不可以。

  問(wèn)題：在包被板使用前必須洗嗎?

  回答：不是必須，但推薦使用，因?yàn)槿绻÷源瞬襟E度可能會(huì)降低。

  問(wèn)題：孵育時(shí)間延長(zhǎng)或縮短可以嗎?

  回答：孵育時(shí)間必須嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作，才能得到佳的結(jié)果。

  問(wèn)題：實(shí)驗(yàn)必須重復(fù)一次嗎?

  回答：不必須，但對(duì)于每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品建議做復(fù)孔。

  問(wèn)題：貴公司的ELISA試劑盒可以檢測(cè)哪些類型的標(biāo)本?

  回答：我們的大多數(shù)ELISA試劑盒均適用于人的血清，血漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它體液。在產(chǎn)品說(shuō)明書和我們的目錄上您會(huì)看到具體的適用范圍。

  問(wèn)題：背景色過(guò)高是什么原因?

  回答：造成背景色過(guò)高主要有以下幾點(diǎn)原因：

  1)不正確的洗滌

  洗滌不充分或省略洗滌步驟中的任何一步均會(huì)導(dǎo)致背景色過(guò)高。

  解決方法：檢查洗滌緩沖液的體積并確保完成所有的洗滌步驟;確保洗滌緩沖液的正確稀釋和正確使用。

  2)底物污染

  確保在使用前，底物不被金屬離子或氧化劑污染;

  在實(shí)驗(yàn)時(shí)留存一些額外的底物

  底物本身不應(yīng)該有顏色

  3)稀釋液污染

  我們的大多數(shù)稀釋液均含有蛋白，在首次開(kāi)瓶時(shí)可能會(huì)造成污染。在從瓶中取液體時(shí)一定要用 “滅菌” 的槍頭

  4) 底物曝光

  底物曝光會(huì)使底物變成蘭色，因此在加入板內(nèi)之前要保存在暗處(即試劑瓶?jī)?nèi))

  5) 偶合物的錯(cuò)誤稀釋

  偶合物濃度過(guò)高會(huì)造成高背景色，因此要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書稀釋

  6) 錯(cuò)誤的孵育時(shí)間和溫度

  必須嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書來(lái)確定孵育時(shí)間和溫度

  7) 包被板保存不當(dāng)

  如果包被板只用了一部分，一定要正確保存剩余的板條。

  問(wèn)題：測(cè)試內(nèi)CV(變異系數(shù))過(guò)高是什么原因?

  回答：造成測(cè)試內(nèi)CV(變異系數(shù))過(guò)高主要有以下幾點(diǎn)原因：

  1)在洗滌或吸取移液時(shí)，刮擦到板孔內(nèi)部引起包被的抗體脫落,注意在洗滌包被板或吸移標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)不要刮擦到板孔內(nèi)表面。

  2)在剝除包被板覆蓋物時(shí)造成孔與孔間的交叉污染

  在每次孵育完成時(shí)，一定要小心地剝除包被板覆蓋物，以免孔與孔間的交叉污染。

  3)樣品不均一

  確保所測(cè)試樣品是均一的，在加入包被板前要混勻

  4)邊緣效應(yīng)

  在孵育時(shí)要封好包被板，并盡可能在100 rpm的振蕩器上孵育。

  5)移液器沒(méi)有正確校準(zhǔn)

  6)在實(shí)驗(yàn)時(shí)，要確保移液器經(jīng)過(guò)正確校準(zhǔn)

  問(wèn)題：標(biāo)準(zhǔn)曲線不對(duì)是什么原因?

  回答：造成標(biāo)準(zhǔn)曲線不主要有以下幾點(diǎn)原因：

  1)凍干標(biāo)準(zhǔn)品重懸不正確

  確保凍干標(biāo)準(zhǔn)品重懸在正確的液體中，并以正確的體積重懸。重懸體積在說(shuō)明書和試劑瓶的標(biāo)簽上均有表明

  2)重懸時(shí)間過(guò)短

  確保足夠的時(shí)間，以完全溶解凍干標(biāo)準(zhǔn)品

  3)濃縮貯存標(biāo)準(zhǔn)品的不正確稀釋

  濃縮貯存標(biāo)準(zhǔn)品要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書正確稀釋

  4)貯存標(biāo)準(zhǔn)品/預(yù)稀釋液的不正確保存

  在說(shuō)明書已注明貯存標(biāo)準(zhǔn)品和預(yù)稀釋液的保存條件，一定要嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。

  5)標(biāo)準(zhǔn)品污染

  使用無(wú)菌槍頭，保存方法正確可以防止標(biāo)準(zhǔn)品的污染。

  6)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)沒(méi)有正確混勻

  在系列稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，要保證每步稀釋時(shí)均正確混勻。

  7)檢測(cè)波長(zhǎng)不正確

  要保證分光光度劑的檢測(cè)波長(zhǎng)是正確的。

  8)使用其它批號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)品

  只能使用同一試劑盒內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品，不可以使用其它批號(hào)/試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品。

  問(wèn)題：不顯色是什么原因?

  回答：造成不顯色主要有以下幾點(diǎn)原因：

  1)測(cè)試前未將試劑恢復(fù)至室溫

  在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前要將所有試劑恢復(fù)至室溫。

  2)某些試劑的不正確保存

  所有試劑的保存方法在說(shuō)明書中均有詳述，要嚴(yán)格依其操作。

  3)HRP偶合試劑的污染

  在此試劑用前一定要確保無(wú)污染。

  4)HRP偶合試劑的不正確稀釋

  如果HRP偶合試劑濃縮液過(guò)度稀釋，則顯色變?nèi)?，要按說(shuō)明書操作。

  5)2組分TMB的不正確混合

  按說(shuō)明書所示比例混合TMB底物，并保證正確混勻

  6)省略孵育步驟

  說(shuō)明書中任何一步孵育步驟均不可省略。

  7)洗滌后或儲(chǔ)存時(shí)，板孔干燥

  洗滌后，在吸水紙上拍打板條以去除多余的洗滌緩沖液，之后要立即進(jìn)行后面的操作步驟或倒口在吸水紙上不超過(guò)15分鐘，以免板孔干燥。

  8)在洗滌或吸取移液時(shí)，刮擦到板孔內(nèi)部引起包被的抗體脫落

  注意在洗滌包被板或吸移標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)不要刮擦到板孔內(nèi)表面。

  9)樣品不適合此檢測(cè)

  在說(shuō)明書中會(huì)列出每種產(chǎn)品的適用標(biāo)本范圍，超出范圍的標(biāo)本可能不適于此試劑盒或者檢測(cè)條件需要摸索(如調(diào)節(jié)稀釋度等)

  問(wèn)題：樣品或標(biāo)準(zhǔn)品 “溢值” 是什么原因?

  回答：造成樣品或標(biāo)準(zhǔn)品 “溢值” 主要有以下幾點(diǎn)原因：

  1)樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋

  要嚴(yán)格按照說(shuō)明書來(lái)稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。

  2)偶合試劑不正確稀釋

  要嚴(yán)格按照說(shuō)明書來(lái)稀釋偶合試劑，濃度過(guò)高會(huì)造成OD的 “溢值” HRP偶合試劑的不正確稀釋

  3)所用稀釋液不對(duì)

  只能使用相應(yīng)試劑盒內(nèi)的稀釋液稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。

  4)檢測(cè)波長(zhǎng)不正確

  要保證分光光度劑的檢測(cè)波長(zhǎng)是正確的。

  5)TMB底物的顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

  請(qǐng)監(jiān)控顯色時(shí)間。說(shuō)明書中所示的顯色時(shí)間可能因?yàn)闇囟群推渌鼨z測(cè)條件的不同而稍有變化。

  6)樣品不適合此檢測(cè)

  在說(shuō)明書中會(huì)列出每種產(chǎn)品的適用標(biāo)本范圍，超出范圍的標(biāo)本可能不適于此試劑盒或者檢測(cè)條件需要摸索(如調(diào)節(jié)稀釋度等)

  7)樣品/標(biāo)準(zhǔn)品污染

  樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的污染可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果 “溢值”。

  8)孵育時(shí)間/溫度不正確

  要嚴(yán)格按照說(shuō)明書來(lái)確定孵育時(shí)間和溫度。

  9)在孵育時(shí)為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物

  在孵育時(shí)需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物，以防止液體蒸發(fā)或孵育期間的污染。每個(gè)試劑盒內(nèi)均有足夠數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物

  ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。古朵試劑盒