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細(xì)菌的培養(yǎng)和生長現(xiàn)象的觀察

發(fā)布時間:2013-07-29瀏覽次數(shù):1707返回列表

一、實驗?zāi)康?br />     1.了解常用培養(yǎng)基的種類。
    2.掌握無菌操作,建立無菌觀念。
    3.初步掌握細(xì)菌接種技術(shù)。
    4.學(xué)會觀察細(xì)菌在常用培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象。
    二、實驗材料
    1.菌種葡萄球菌、大腸埃希菌。
    2.培養(yǎng)基普通瓊脂平板、斜面培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基。
    3.器材接種環(huán)、接種針、酒精燈、培養(yǎng)箱、試管架等。
    三、實驗內(nèi)容
    (一)細(xì)菌的接種方法
    平板劃線接種法分離培養(yǎng)法)
    【實驗原理】
    通過在平板上劃線,將混雜的細(xì)菌在瓊脂平板表面充分的散開,使單個細(xì)菌能固定在一點生長形成單個菌落,以達(dá)到分離純種的目的。若需從平板上獲取純種,則挑取一個菌落做純培養(yǎng)。
    【操作方法】(分段劃線法)
    1.右手拿接種環(huán),燒灼冷卻后,以無菌操作方法蘸取細(xì)菌標(biāo)本少許。
    2.左手持瓊脂平板,以左手拇指和食指將平板蓋啟開,右手將取了菌液的接種環(huán)伸人平板,將已葫菌的接種環(huán)在瓊脂表面密集而不重疊地來回劃線,面積約占整個平板的1/6- 1/5,此為區(qū)劃線。
    3.將接種環(huán)置于火焰上滅菌,冷卻后(可接觸平板試之,如不融化瓊脂,即已冷卻),開始第二區(qū)來回劃線,且在開始劃線時與區(qū)的劃線相交數(shù)次(2-3次為宜),以后劃線不再相交。
    4.后用同樣方法進(jìn)行第三區(qū),必要時也可繼續(xù)第四區(qū)、第五區(qū)劃線(圖5-1)

    5.接種完畢,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后,放回原處;蓋好培養(yǎng)皿蓋子,倒置(平板底部向上),做好標(biāo)記;放37℃溫箱培養(yǎng)18-24h后,觀察結(jié)果。注意是否分離出單個菌落,并記錄菌落特征如大小、形狀、透明度、色素等。
    【注意事項】
    1.嚴(yán)格無菌操作,避免空氣及呼吸道中的細(xì)菌落人培養(yǎng)墓內(nèi)。
    2.劃線接種時,角度、力度要掌握好,接種環(huán)與瓊脂成30°~40°角輕輕接觸,利用腕力滑動,切忌劃破瓊脂,并充分利用平板的表面積,以達(dá)到分離的目的。

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