由于市場(chǎng)上沒有銷售雞抗豬抗體檢測(cè)試劑盒，所以實(shí)驗(yàn)室只有自建ELISA檢測(cè)方法，通過對(duì)包被液、封閉液、待檢樣品濃度、酶標(biāo)抗體濃度、顯色時(shí)間等條件的摸索，確定佳條件，同時(shí)做了特異性檢測(cè)。確定判定標(biāo)準(zhǔn)為OD450nm≧0.826時(shí)判定為陽性。
    步驟：
    1、全病毒用包被液稀釋以佳濃度包被酶標(biāo)板，100uL/孔，4℃過夜。
    2、拿出包被的酶標(biāo)板回復(fù)室溫，棄包被液，280uL/孔 PBST洗滌3次，每次3min，拍干。
    3、加入合適的封閉液，100uL/孔，37℃封閉1h，拍干。
    4、待檢測(cè)樣品用抗體液稀釋到佳濃度，100uL/孔，37℃孵育1h，洗滌3次，拍干。
    5、HRP-兔抗雞 二抗，用抗體稀釋液按佳濃度稀釋，100uL/孔，37℃孵育45min，洗滌3次，拍干。
    6、用TMB顯色試劑盒，按說明依次加入溶液A，溶液B，室溫避光反應(yīng)。

                                                          （本文內(nèi)容來源于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系我們刪除）