ELISA試驗產(chǎn)生氣泡分析
發(fā)布時間:2024-07-22瀏覽次數(shù):676返回列表
1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸。
2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一。
3.包被時有氣泡的話,將導(dǎo)致包被不完全實際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。
4.封閉時有氣泡的話,將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點的存在,引起非特異性結(jié)合--本底增高,假陽性。
5.加樣時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性。
6.加二抗時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性(競爭法相反----假陽性)。
7.加顯色液時有氣泡的話---顯色不完全。
8.加終止液時有氣泡的話(1、不能完全終止反應(yīng) 2、影響酶標(biāo)儀比色,OD值增高)
9.洗滌時有氣泡的話,非特異性結(jié)合物不能完全洗去,做無用功。
避免方法:
1.加樣時盡量靠近孔底(不要接觸孔底),用力均勻,不要過快過猛。
2.封閉時一定要加滿孔,
3.洗滌時一定要加滿孔(重要),氣泡會浮上來*終驅(qū)除。手工洗板時一定要吸干水分并用力拍干。