質(zhì)粒分類: 基因文庫(kù)質(zhì)粒
原核抗性: Kan
克隆菌株: Stbl3
培養(yǎng)條件: 37度
質(zhì)粒宿主: 大腸桿菌
質(zhì)粒用途: 基因模板
片段類型: ORF
片段物種: 病毒
原核抗性: Kan
質(zhì)粒簡(jiǎn)介:Po
質(zhì)粒序列
atgggtgccc cgacgttgcc ccctgcctgg cagccctttc tcaaggacca
121 ccgcatctct acattcaaga actggccctt cttggagggc tgcgcctgca ccccggagcg
181 gatggccgag gctggcttca tccactgccc cactgagaac gagccagact tggcccagtg
241 tttcttctgc ttcaaggagc tggaaggctg ggagccagat gacgacccca tagaggaaca
301 taaaaagcat tcgtccggtt gcgctttcct ttctgtcaag aagcagtttg aagaattaac
361 ccttggtgaa tttttgaaac tggacagaga aagagccaag aacaaaattg caaaggaaac
421 caacaataag aagaaagaat ttgaggaaac tgcgaagaaa gtgcgccgtg ccatcgagca
481 gctggctgcc atggattga

一、載體分類及載體組成元件
載體分類
1、按屬性分類:病毒載體和非病毒載體
病毒載體是一種常見的分子生物學(xué)工具,可將遺傳物質(zhì)帶入細(xì)胞,原理是利用病毒具有傳送其基因組進(jìn)入目的細(xì)胞,進(jìn)行感染的分子機(jī)制??砂l(fā)生于完整活體或是細(xì)胞培養(yǎng)中??蓱?yīng)用于基礎(chǔ)研究、基因療法或疫苗。用于基因治療和疫苗的病毒載體應(yīng)具備以下基本條件:
(1)攜帶外源基因并能包裝成病毒顆粒;
(2)介導(dǎo)外源基因的轉(zhuǎn)移和表達(dá);
(3)對(duì)人體不致?。?br /> (4)在環(huán)境中不會(huì)引起增殖和傳播。
非病毒載體一般是指質(zhì)粒DNA。
2、按進(jìn)入受體細(xì)胞的類型分類:原核載體、真核載體、穿梭載體(含原核和真核2個(gè)復(fù)制子,能在原核和真核細(xì)胞中復(fù)制,并可以在真核細(xì)胞中有效表達(dá))。
3、按功能分類:克隆載體、表達(dá)載體
克隆載體:具有克隆載體的基本元件(Ori,Ampr,MCS等),可以攜帶DNA--pian段或外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞并克隆和大量擴(kuò)增DNA-pian段(外源基因)的載體。
表達(dá)載體:克隆載體中加入一些與表達(dá)調(diào)控(具有轉(zhuǎn)錄/翻譯所必需的DNA順序)有關(guān)的元件即成為表達(dá)載體。
載體組成元件
1、復(fù)制起始位點(diǎn)Ori:即控制復(fù)制起始的位點(diǎn)。Ori的箭頭指復(fù)制方向,其他元件標(biāo)注的箭頭多指轉(zhuǎn)錄方向(正向)。
2、抗生素抗性基因:可以便于加以檢測(cè),如Amp+ ,Kan+
(1)Ampr:水解β-內(nèi)酰胺環(huán),解除氨芐的毒性。
(2)tetr :可以阻止四環(huán)素進(jìn)入細(xì)胞。
(3)camr:生成氯霉素羥乙酰基衍生物,使之失去毒性。
(4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶,使G418(卡那霉素衍生物)失活。
(5)hygr:使潮霉素β失活。